연세대학교 공동기기원 - Yonsei University

 Fluorescence-activated single cell sorting (FACS)란,
 Flow cytometry로 분석된 세포들 중에서 특정 세포만을 분류해내는 Sorting 기법으로
 Flow cytometry 기계에 추가적으로 설치된 장치가 원하는 세포가 포함된 물방울에 전하(Electronic charge)를 부여하고,
 전하에 따라 해당 세포를 분류해내는 기술이다.

 해당 기기는 초고속 유세포 분석/분리기로서 세포 면역학, 종양학, 분자 생물학, 조직학 등의
 분야에서 폭넓게 적용할 수 있는 성능으로 한 번에 최대 18종류의 형광을 측정할 수 있다.
 또한, 최적의 세포 분리 속도는 초당 25,000에서 70,000개의 세포이며 최대 100,000개의 세포를 분석할 수 있으며,
 기본적으로 subset의 동정, counting 및 sorting 할 수 있다.

1. 제작사: Beckton Dickinson

2. 모델명: BD FACSAria Fusion

3. 설치장소: 첨단과학기술연구관 203호

4. 기기 특성
     1) 3 laser & 15 color (최대 5L/18C), Air Pressure Fluidics
          405(violet), 488(blue), 640(red) laser 설치
     2) Software: FACSDiva
     3) single cell sorting function
     4) 4-way sorting
     5) sorting nozzle: 70, 85, 100 ㎛ (130㎛ 노즐 구매 필요)     

1. Flow cytometry를 통해 형광항체를 사용하여 세포에서 발현되는 단백질의 발현정도를 수치화하고, 분류할 수 있다.

2. HIV immunophenotyping, CD4 absolute count, reticulocyte enumeration, 조직적합성 판정 등에 적용할 수 있다.
     임상 분야에서는 cell cycle analysis, ploidy analysis, immune function studies, multi-drug resistance studies, kinetic, platelet analysis,
     그리고 flow and FISH(fluorescence in-situ hybridization) 등의 분야에 활발히 사용되고 있다.

1. Sample 준비 시 반드시 Control 준비
    (ex. unstained, isotype control, non transtected cell etc.)
2. 2 color 이상의 multicolor 시에는 반드시 single stained cell 준비 해주세요
3. sample은 반드시 strainer에 걸러서 준비해주세요

[ Sorting 서비스 ]
1. Sample의 세포수는 최소 1*10⁶/ml 이 되게 해주세요
density 가 낮은 경우 cetrifuge 등으로 농도를 높게 준비해주세요
필요에 따라 buffer에 희석해 분석합니다. 희석할 solution도 같이 준비해주세요

2. Sorting buffer
PBS(Ca/Mg++ free) or HBSS(Ca/Mg++ free) or MEDIA
+ 2~5% FCS or FBS or 0.5~2% BSA
+ final 25mM HEPES (pH7.5) (optional cell size가 작으면 권장)
+ final 2mM EDTA (optional aggregation이 잘 일어나는 cell이면 권장)
→ 1.2uM filter sterilize . store at 4℃

3. Sorting cell density
lymphocytes : ~ 4 x 10⁷/ml
cancer cell line : ~ 4 x 10⁶/ml (Max 1 x 10⁷ /ml) in sorting buffer
cell strainer로 cell 걸러서 준비해주세요

4. Cell collection tube
5ml tube : 1ml buffer 담아 오세요
15ml tube : 3ml buffer 담아 오세요
PBS(Ca/Mg++ free) or HBSS(Ca/Mg++ free) or MEDIA
+10% FBS or FCS or 0.5~ 2% BSA

sample은 반드시 strainer에 걸러서 준비해주세요
분석 도중 노즐이 막히는 경우(clog 발생), 정상 작동까지  지연된 시간은 분석 시간에서 제외되지 않습니다.

직접 사용자 서비스 오픈 및 기기 사용법 교육은 진행하지 않습니다.