연세대학교 공동기기원 - Yonsei University

<기기 특징>

• Confocal laser scanning microscope의 가장 큰 특징은 Confocal Mode에서 시료를 광학적으로 section 하여 Blurring이 없는 선명한 광학적 절편 상을 얻는 것이다. 따라서 시료에 일체 손상이 없이 그 형태 및 내부 구조를 시각화 할 수 있으며 전용의 투과광 Detector에 의해 고해상도의 투과광상과 함께 염색체, 세포 등 시료의 3차원 구조 및 미세 형태 해석에 유용하다.
• Confocal의 원리를 이용하여 초점이 맞지 않은 영역을 제거함으로써 정확하게 focus가 맞는 image만을 얻을 수 있기에 세포 내부 및 외부의 정보를 고해상도로 얻을 수 있다.
• 발생학, 생화학, 세포생물학, 세포 생리학, 분류학, 해부학에 이르기까지 넓은 부분에 걸쳐 많은 응용부분을 지니고 있다.
• LSM 880시스템은 기존의 필터 system 기능에서 벗어나 새로운 Beam Splitter를 장착하였다. 이러한 Detector는 파장에 따른 Scanning을 한 후 고유의 Spectrum 지문 (Spectrum Finger printing)을 얻고 Lambda Stack이란 기능으로 각각의 특정의 형광파장을 갖는 spectral data를 얻게 되는데, 얻어진 spectral database에 의해 unmixing 기능으로 cross talk가 제거된 화상을 작성 할 수 있다. 또한 전동식 Stage를 장착하여 tile scan image 획득도 가능하다.
• GaAsP detector 가 장착되어 형광이 약한 시료의 경우에도 3배 강한 감도로 이미지를 얻을 수 있다.

<기기 사용 효과>

• 형광으로 염색 되어진 시료의 3차원 구조를 파악할 수 있다.
• 다중형광 염색시료의 관찰시 cross-talk 이 적다. (cross talk : 형광의 spectral 이 겹쳐져 있는 현상)
• 정량 형광 분석이 가능하다. (colocalization 등)
• FRET (Fluorescence Resonance Energy Transfer) : 형광 Protein인 CFP의 Emission 에너지가 YFP의 Excitation 으로 작용하여 YFP의 Emission을 통해 나타나는 현상이다. 단백질의 분자 상호 작용을 밝히는 대표적인 Method로 이용된다.

• 현미경 (Inverted Stand, Axio Observer)
• 대물렌즈 (10x, 20x, 40x_W, 63x_Oil, 100x_W)
• 레이저 (405 / 458 / 488 / 514 / 561 / 633 nm)
• 전동식 Stage
• Detector: GaAsP detector (1ea), confocal FL detectors (2ea), transmitted DIC detector (1ea)
• software: ZEN (black ver.)

암연구, 오가노이드(organoids)와 스페로이드(spheroids), 신경과학, Fluorescence lifetime imaging microscopy (FLIM), Fluorescence cross correlation spectroscopy (FCCS)

• 해당 장비는 dye가 부착된 바이오시료를 관찰하는 confocal 현미경입니다
  형광(dye) 처리 되지 않은 시료는 material用 confocal 현미경으로 관찰해야 합니다
  코팅 두께 및 film 두께 측정은 어렵습니다
• 시료에 처리된 dye 또는 excitation/emission 파장에 대한 정보가 필요합니다
• inverted type으로 렌즈에 닿는 쪽이 cover glass(170 μm)가 위치하도록 시료를 준비해주시기 바랍니다
  일반 slide glass 사용 시, 레이저가 투과되지 않는 영역은 관찰되지 않을 수 있습니다 (X-ray 방식과 다름)
• 시료와 glass가 건조/고정되어 있지 않은 경우, 이미지 scan 중 시료가 움직여 선명한 이미지가 촬영되지 않을 수 있습니다

※ 기기사용 중 본인 부주의로 인한 고장은 책임지고 보상해야함.

※ 기기사용료 미납시 기기사용을 제한함.

※ 장비 사용 취소 패널티: 예약일기준 3일 이내 취소시 100%
      기기 예약 취소 관련 문의는 내역 확인을 위해 메일로 남겨주시기 바랍니다.
      원유림 won2203@yonsei.ac.kr